Нет, не надо прозрачность задавать как Path.
Допустим, имеете картинку на прозрачном фоне, жмёте в фотошопе Save for web, и выбираете gif или png-8. Дальше выберете количество цветов до 256, подложку для перехода в прозрачность. Обычно это цвет основного фона, который будет на сайте.
А вообще, лучше PNG-24. Там с альфа-каналом всё лучше и 24 битный цвет. Но Internet Explorer его не поддерживает. Точнее, некорректно отображает, а это легко обходится простенькими средствами CSS и JS. с этим разберутся те, кто будет вёрсткой сайта заниматься.
72 dpi не хватает, ну делайте картинку больше в ширину-высоту.
Вопрос про 300 dpi не очень поняла. Вы в фотошопе Alt+Ctrl+0 нажмите, и увидите как картинка будет отображаться на экране.